Каталог интернет сайтов и статей - catMinta.ru
folder Статистика: Сайтов 11173 Статей 5602 Категорий 209 Средний CY 19 Средний PR 0.06
Реклама:  

Ходьба хромосомы


Ходьба хромосомы - метод, используемый, чтобы клонировать аккуратным способом сегменты ДНК вдоль хромосомы, начинающейся в любом пункте, для которого у нас есть исследование. Чтобы создать серию перекрывания на клонированные фрагменты ДНК, это начинается с одного клона из библиотеки, и затем идентифицирует второго клона, вставка которого накладывается со вставкой в первом клоне. Это было первым методом, названным ходьбой хромосомы, разработанной для собрания клона contigs. Но есть ограничение к скорости ходьбы хромосомы, и это из-за небольшого размера фрагментов, которые должны быть клонированы, другое ограничение - трудность ходьбы через повторную последовательность, которые рассеяны через ген. Более прямой подход таким образом должен использовать ДНК вставки от начинающего клона как исследование скрещивания, чтобы показать на экране всех других клонов в библиотеке. Положительные сигналы скрещивания, которые даны клонами, чье наложение вставок с исследованием, используются в качестве новых исследований, чтобы продолжить прогулку. Есть приблизительно 96 клонов, из которых состоит библиотека, и каждый клон содержит различную вставку. Вставка от одного из отобранных клонов тогда используется в качестве исследования скрещивания со всеми другими клонами в библиотеке.У исследования может быть геном широкое повторение sequencesand, это - проблема, с которой стоят во время прогулки как тогда, это не только скрестится к перекрыванию на клонов, но будет также не накладывающемуся клону, вставки которого также содержат копии повторения. Это нежелательное скрещивание может быть уменьшено, блокируя повторную последовательность с предварительным скрещиванием с немаркированной геномной ДНК. Но это не то, что эмоциональное решение особенно в случае, когда векторы высокой производительности, такие как BACs или YACs используются в прогулке. Поэтому для прогулок хромосомы с человеческой ДНК, у которых есть высокий показатель повторения, неповрежденные вставки не используются вообще. Вместо этого исследование взято от конца вставки (короткий фрагмент конца), у которого есть меньший шанс повторения. Прогулка может также быть ускорена при помощи PCR вместо скрещивания, чтобы идентифицировать клонов с перекрыванием на вставки. Учебники для начинающих, используемые в попытке PCRs с другими клонами в библиотеке, разработаны от последовательностей фрагментов конца ДНК. Далее более высокие скорости могут быть достигнуты при помощи групп клонов, смешанных вместе таким образом, что однозначный клон перекрывания может быть сделан. Но заботу нужно соблюдать, поскольку двусмысленности могли бы возникнуть в этом случае также.Эта процедура хорошо подходит для позиционного клонирования, когда цель здесь состоит в том, чтобы идти от нанесенной на карту марки до гена вставки. Но для процесса собирающегося клона contigs через весь геном, процедура, оказывается, плохой выбор. Таким образом, поскольку альтернативная техника печати пальца клона процедуры используется. Метод предоставляет информацию относительно физической структуры клонированного фрагмента ДНК, и эта информация (названный отпечатком пальца) может быть по сравнению с данными других клонов, таким образом позволяет идентифицировать наложения, у которых могли бы быть общие черты.


Реклама:    

Каталог интернет сайтов и статей - catMinta.ru info